Contente

• Dar um passo
• Parte 1 de 2: Verificando a calibração
• Parte 2 de 2: Calculando os resultados

Uma pipeta é um tipo de equipamento de laboratório usado para medir e transferir quantidades muito pequenas de líquido. Exatidão e precisão na medição da pipeta são necessárias porque qualquer desvio nos volumes entregues pode afetar os resultados de um experimento. Para garantir a precisão, é necessário verificar a calibração da pipeta a cada poucos meses. O processo de calibração ajuda a verificar se o equipamento está dispensando os volumes corretos para que possa ser restaurado caso não esteja.

Dar um passo

Parte 1 de 2: Verificando a calibração

1. Reúna os materiais necessários. Para verificar a calibração de uma pipeta, você precisa de uma pipeta, ponteiras, água destilada, copo, termômetro, balança e pratos. A balança deve ser específica para microgramas para calibrar micropipetas com no máximo 1 µl.
   • Você não precisa de mais de 5 ml de água. Encha o copo com água.
   • Certifique-se de que as pontas da pipeta se encaixam corretamente.
2. Meça a temperatura da água destilada. Coloque o termômetro na água e deixe descansar por pelo menos um minuto. Se a linha vermelha no termômetro ainda estiver se movendo, deixe agir por mais um minuto. Depois de um minuto, anote a temperatura em um caderno. Remova o termômetro e seque-o quando terminar.
   • A temperatura da água é importante para os cálculos feitos para verificar a calibração.
3. Coloque a balança na balança e coloque-a em zero. O ideal é usar uma balança com portas e uma sala isolada. Coloque a tigela na sala e feche as portas. Se não houver portas, basta colocar a tigela na balança. Pressione o botão "Zero" ou "Tara" e aguarde a leitura da balança zero.
   • Ao colocar a balança em zero, o peso da tigela de plástico não é levado em consideração e torna-se possível medir apenas o peso do que você coloca na tigela.
4. Prepare a pipeta para calibração. Antes de começar, limpe a pipeta com etanol para eliminar quaisquer contaminantes - além disso, certifique-se de que a ponta da pipeta não fica obstruída. Coloque a ponta correta na extremidade e defina o volume que deseja testar.
   • Antes da calibração, você testa o menor volume e o maior volume que a pipeta pode dispensar.
5. Lave a ponta antes de calibrar. Empurre o botão até a primeira parada e insira a ponta na água destilada de forma que cerca de 2 mm dela fique submersa no líquido. Solte o botão para retirar um pouco do líquido e, em seguida, distribua o líquido novamente pressionando o botão para baixo. Repita três vezes para enxaguar a ponta.
   • Empurre o botão até a segunda parada para dispensar qualquer líquido remanescente na ponta e remova a pipeta da água.
6. Aumente o volume de calibração. Com a ponta fora do líquido, empurre o botão até a primeira parada. Coloque cerca de 2 mm da ponta na água destilada e solte o botão para puxar o líquido para a ponta. Espere cerca de um segundo antes de remover a ponta da água.
   • Certifique-se de que a ponta esteja completamente submersa durante todo o processo de aspiração. Você não quer bolhas na ponta ou o resultado não ficará certo.
7. Doseie o líquido da tigela sobre a balança. Coloque a ponta contra o fundo da tigela e empurre o botão até a primeira parada. Mova-se para outro local, ligeiramente afastado da água, e empurre o botão até a segunda parada. Segure o botão e levante a ponta da tigela.
   • Mantenha a ponta da pipeta, pois você a utilizará novamente para fazer mais testes de calibração. Certifique-se de que a ponta não toque em nada.
8. Registre o peso que indica a balança. Feche a porta se estiver usando uma balança em uma sala isolada. Aguarde até que os valores parem de mudar. Registre este valor em seu caderno.
   • É importante esperar que o número se estabilize antes de anotá-lo. Suas leituras estarão erradas se você não esperar.
9. Repita este processo até ter feito pelo menos 10 medições. Ajuste a balança para zero, lave a ponta, extraia o mesmo volume, distribua o volume e registre o peso. Você precisa de várias gravações do mesmo volume e, em seguida, pode obter a média de todas as gravações juntas.
   • Você pode repetir esse mesmo processo com volumes diferentes, desde que faça várias medições por volume.

Parte 2 de 2: Calculando os resultados

1. Use a fórmula para o volume calculado. A fórmula para calcular o volume entregue pela pipeta é V = w * Z, onde w é o peso da água, Z é o fator de conversão com base na densidade da água e V é o volume calculado de quanta água lá é entregue.
   • Você pode encontrar a variável Z observando a densidade da água usando a temperatura registrada no início do experimento.
   • Por exemplo: Se a temperatura da água era 23 ° C, então você assume um valor Z de 1,0035 µg / mg.
2. Calcule a média das tentativas repetidas. Você deve ter pesado o volume de água dispensado pela pipeta pelo menos 10 vezes. Para calcular a média de todos esses valores, some-os e divida por 10. Se você fez mais ou menos tentativas, some cada tentativa e divida a soma pelo número total de tentativas.
   • Por exemplo: Os dez pesos que você registrou para um volume de pipeta de 10 µl são os seguintes: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 e 9,98.
   • A média é: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Aplique as variáveis ​​à equação e resolva. Depois de determinar os valores corretos para cada variável, você pode incorporá-los à equação e resolver o volume calculado. Para resolver isso, basta multiplicar o peso médio de todos os valores de teste pelo valor Z.
   • Por exemplo: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
4. Calcule a precisão da pipeta. Para calcular a precisão, você pode usar a equação A = 100 x V._média/ V₀ onde A é a precisão da pipeta, V._média o volume médio calculado e V.₀ o valor que você definiu para a pipeta. A precisão deve estar entre 99-101%.
   • Se a pipeta estiver devidamente calibrada, o valor calculado deve ser muito próximo do valor real definido na pipeta.
   • Por exemplo: A = 100 x V_média/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Esta pipeta está devidamente calibrada.
5. Envie a pipeta para calibração, se necessário. Se sua pipeta falhar no teste de calibração, pare de usá-la para experimentos imediatamente. As pipetas são peças muito delicadas e caras do equipamento de laboratório. Você não pode consertar a calibração sozinho, portanto, deverá enviá-la para uma manutenção adequada. Como alternativa, algumas empresas irão ao seu laboratório e calibrarão suas pipetas lá.
   • Para manutenção, entre em contato com a empresa que fabrica sua marca de pipeta específica.